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纳米PCR产品说明书

点击: 日期:2016-12-31

纳米PCR产品说明书 上海户实纳米PCR产品说明书

名称: NanoPCR试剂盒试验机>产品目录号:NHS21⑸
产品说明:本试剂盒既适用于高GC序列的扩增,也适用于1般PCR扩增。产品定位于解决目前市场上难于扩增的若干PCR反应。纳米PCR是纳米材料辅助的基因扩增技术,研究表明某些纳米材料可以增强基因扩增的整体效力。
产品内容:25ul/250次 配置以下:
2×NanoPCR buffer 11⑴ (1000ul);
2×NanoPCR buffer 11⑵ (1000ul);
2×NanoPCR buffer 11⑶ (1000ul);
dNTPs (2.5mM)(300ul);
MgCl2 (25 mM) (500ul);
Taq DNA polymerase (5 U/ul) (60ul)
使用建议
纳米材料容易聚集,每次使用前请震荡均匀再使用。PCR产物中含有的纳米材料1般不影响电泳等后续操作。1个典型的PCR反应(举例:扩增1个高GC片断780bp)设计以下:



12ul反应
25ul反应
2×NanoPCR buffer⑴1
6.0 ul
12.0ul
dNTPs (2.5 mM)
1.0 ul
2.0ul
MgCl2 (25 mM)
1.2 ul
2.5ul
Primer 1(2 uM)
0.8 ul
1.6ul
Primer 2(2 uM)
0.8 ul
1.6ul
Template DNA (~10 ng/ul)
0.2 ul
0.4ul
Taq DNA polymerase (5 U/ul)
0.2 ul
0.4ul
ddH2O
1.8 ul
4.包装抗压试验机厂家5ul

PCR程序举例:[94℃⑸min];[94℃⑶0s,56℃⑶0s,72℃⑷0s]×35 cycles(循环数可依照PCR产物的多少适当调理);[72℃⑸min]. 如果不肯定最好退火温度,可以先做梯度PCR肯定最好退火温度。
批量PCR需要计算并计划好实验中所需要混合的mix总量和需要单独加入PCR体系中的成份和加量。例:做以不同基因组为模板的9管12ul体系的PCR。计入加样消耗,按10管加量计算。实验操作全进程建议在冰盒上进行。
12ul反应

2×NanoPCR buffer⑴1
6.0 ul
×10=60
dNTPs (2.5 mM)
1.0 ul
×10=6
MgCl2 (25 mM)
1.2 ul
×10=12
Primer 1(2 uM)
0.8 ul
×10=8
Primer 2(2 uM)<恒温恒湿箱试验箱/br>0.8 ul
×10=8
Template DNA (~10 ng/ul)
0.2 ul
单独添加
Taq DNA polymerase (5 U/ul)
0.2 ul
×10=2
ddH2O
1.8 ul
×10=18

依照上表所描写的将mix做好,并反复摇晃15⑵0下、上下振荡后离心(大约待离心机转到7000rpm随即停下来就好),离心后,用枪头分别加入相应基因组0.2ul的PCR管内,每管11.8ul并用枪头顺便混合3下使均匀。放入PCR仪进行PCR。